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品系基本信息

C57

特性和用途

过敏性支气管哮喘小鼠(OVA诱导

建模方法

1.明矾致敏佐剂:10%明矾溶液(溶于双蒸水)2ml500ug/ml OVA(溶于PBS2ml等量混合后,用NAOHPH值为6.5,室温孵育60min750r/min,离心5min,去掉上清液,重溶于2ml PBS。致敏时每只小鼠腹腔注射200ul,其中含2mg明矾和100ug OVA

2.致敏:小鼠分别于第014天时腹腔注射明矾致敏佐剂0.2ml,对照组注射相同剂量的PBS溶液,正常饮食饲养。

3.激发:雾化吸入,第21天时小鼠放入有机玻璃箱,5% OVA雾化吸入。每天30min,共7d,最后一次致敏后24h内检测。以小鼠出现烦躁不安、呼吸急促、腹肌痉挛等阳性反应作为造模成功的标准。对照组采用PBS雾化吸入,其他操作均相同。

4.末次激发24h麻醉小鼠,摘眼球取血,室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清,放入-80冰箱冻存。取左肺组织于4%多聚甲醛溶液中固定用于病理染色;右肺组织液氮冷冻,-80℃保存用于分生标本。

模型评价

1.一般观察 哮喘模型组小鼠在激发开始后出现打喷嚏、点头呼吸、呼吸急促、哮鸣音、腹肌收缩、烦躁等典型哮喘发作症状,并且后期观察中发现饮食减少、毛色无光泽、行动迟缓及体重逐渐下降。

2.支气管肺泡灌洗液(BALF)的收集最后1次激发24 h(28)将各组小鼠颈椎脱臼处死,无菌条件下分离气管,结扎左主支气管后,剪开右主支气管插入气管导管并固定,无菌生理盐水灌洗3次,1mL/次,收集的BALF4℃,1200 R/min离心5 min,弃去上清液,PBS重悬细胞沉淀并涂片

,进行细胞分类。

应用

用于研究哮喘的发病机制,研发治疗和预防哮喘的药物

 



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