品系基本信息
特性和用途
Cas9-gRNA 靶点效率检测试剂盒
原理：
CRISPR/Cas9 是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御，可特异剪切外源的病毒及 DNA 以对抗入侵。人工改造过的 Cas9/gRNA 系统通过 gRNA(short guide RNA)引导 Cas9 蛋白识别并剪切带有 gRNA 靶点的双链 DNA, 用于基因敲除和精确
编辑 DNA 等操作。利用 CRISPR 技术进行基因敲除和编辑操作实验前，获得剪切活性高的 gRNA 靶点是实验成功的关键。Cas9/gRNA 剪切活性与 gRNA 靶点的识别序列有关，每个 gRNA 的剪切活性都会不同。
本方法通过 spCas9/gRNA 体外酶切靶点 DNA 片段，进行 gRNA 靶点活性的评估。体外 spCas9 酶切 DNA 效果与 DNA 浓度、spCas9 酶量、反应时间、gRNA 的量、靶点活性有关，为了科学地评价 gRNA 靶点效率，将固定 DNA 浓度和 spCas9 酶量，在一定
单位时间内，测量 spCas9 酶切靶点 DNA 的效率，并通过与已知有活性的 gRNA 靶点进行比较，评价目标 gRNA 靶点的活性。
产品组成：
组成 |
货号 |
VK007-10T |
VK0107-30T |
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Csa9 酶切试剂 |
Cas9(1U/μL) |
VK007-10 |
12μL |
34μL |
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10×saCas9 buffer |
VK007-11 |
50μL |
200μL |
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外体转录试剂 |
T7RNA Polymerase Mix(5U/μL) |
VK007-12 |
22μL |
62μL |
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rNTP(100mM,rATP/rUTP/rCTP/rGTP) |
VK007-13 |
24μL |
64μL |
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10×Transcription Buffer |
VK007-14 |
24μL |
64μL |
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Stop Solution |
VK007-15 |
200μL |
500μL |
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DNasel(1U/μL) |
VK007-16 |
24μL |
64μL |
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标准 gRNA |
标准 gRNA 模板(50ng/μL) |
VK007-17 |
20μL |
60μL |
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标准 gRNA1(g1) 引物 g1-FP(10μM) |
VK007-18 |
10μL |
30μL |
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标准 gRNA2(g2) 引物 g2-FP(10μM) |
VK007-19 |
10μL |
30μL |
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反向引物 gRNA-RP(10μM) |
VK007-20 |
30μL |
100μL |
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DEPC H2O |
VK007-21 |
1mL |
1mL |
注意：收到试剂盒后，使用前请离心，避免试剂滞留在离心管盖上。
保存条件：请将产品于 -20℃ 保存，避免反复冻融。
验证数据
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